Diagnóstico pré-natal utilizando material fetal isolado do sangue periférico materno / Prenatal diagnosis using fetal material isolated from maternal peripheral blood

As anomalias cromossômicas apresentam grande incidência entre os nativivos e natimortos, constituindo a maior causa de morte fetal em países desenvolvidos, no período perinatal. Tradicionalmente, o diagnóstico dessas cromossomopatias é feito por procedimentos invasivos, que não são isentos de complicações materno-fetais. O desenvolvimento de técnicas que permitem identificação e o isolamento de células fetais e de DNA fetal livre no sangue periférico materno tem permitido o diagnóstico precoce das anomalias cromossômicas, tornando-se, desse modo, uma área de intensas pesquisas. Estudos mais recentes também envolvem a identificação e quantificação de mRNA fetal na circulação materna, o que torna possível a análise da expressão gênica fetal durante a gestação. O resgate de material fetal em sangue periférico materno e sua utilização no diagnóstico de várias doenças fetais é uma área de grande interesse na medicina fetal atual. Estudos são necessários para se avaliar melhor o papel propedêutico dessas novas técnicas, assim como sua aplicabilidade na prática clínica rotineira.

Chromosomal abnormalities show great incidence among live birth and stillbirth, becoming the major fetal death cause during the perinatal period in developed countries. Traditionally, the diagnosis of these chromosomal abnormalities is performed through invasive techniques which are not free from maternal-fetal complications. The development of techniques that allows identification and isolation of fetal cells and free fetal DNA in peripheral maternal blood has afforded the early diagnosis of chromosomal abnormalities and, therefore, become an intensive area of research. Recent studies describe the identification and qualification of fetal mRNA in the maternal circulation, which makes possible fetal gene expression analysis during pregnancy. The identification of fetal material in maternal circulation and its value on the diagnosis of several fetal diseases is a great area of interest in the current fetal medicine. Studies are necessary to evaluate the best propedeutic role of these new techniques, as well as their applicability in the routine clinical practice.

Mutações predisponentes à trombofilia em indivíduos de Minas Gerais - Brasil com suspeita clínica de trombose / Predisposing thrombophilic mutations in individuals with clinical suspicion of thrombosis from Minas Gerais, Brazil

A trombose é reconhecidamente uma doença de caráter multifatorial. Sua ocorrência está intimamente relacionada à presença de fatores genéticos e adquiridos que concorrem isoladamente ou em associação para o seu desencadeamento. No entanto, a frequência dos fatores genéticos pode variar de acordo com a origem étnica e com outros aspectos epidemiológicos dos grupos de indivíduos e populações estudadas. No Brasil, dados referentes a indivíduos brasileiros e em especial do estado de Minas Gerais são escassos. O objetivo do presente estudo foi investigar a frequência das mutações fator V Leiden e G20210A no gene protrombina em 1.103 indivíduos com suspeita clínica de trombofilia, empregando a técnica da reação em cadeia da polimerase seguida de restrição enzimática (PCR-RFLP). Os dados foram analisados usando-se o programa Epi Info versão 6.04. A amostra consistiu de 76,16 por cento mulheres e 23,84 por cento homens, com média de idade de 43,06± 14,65. A mutação fator V Leiden foi observada em heterozigose em 7,52 por cento dos indivíduos e em 0,36 por cento em homozigose. A mutação G20210A no gene da protrombina apresentou-se em heterozigose em 5,90 por cento dos indivíduos e em homozigose em 0,18 por cento. O presente trabalho mostra a importância dos testes genéticos conforme o perfil da população analisada, ressaltando informações epidemiológicas da população brasileira e benefícios clínicos.

Thrombosis is known to be a multifactorial disease. Its incidence is directly related to the presence of genetic and acquired factors that concur separately or in association to its appearance. However, the frequency of genetic factors can vary according to ethnic background and with other epidemiological aspects of populations. Data from Brazilian individuals and especially those from the State of Minas Gerais are scarce. The present study aims at investigating the frequencies of the factor v Leiden and the G20210G prothrombin gene mutations of 1103 individuals with clinical suspicion of thrombophilia employing the Polymerase Chain Reaction technique followed by enzymatic restriction (PCR-RFLP). The data were analyzed using the Epi Info computer program version 6.04. The sample constituted of 76.16 percent women and 23.84 percent men, with an average age of 43.06 ± 14.65 years. The factor V Leiden mutation was observed as heterozygosis in 7.5 percent of individuals and as homozygosis in 0.36 percent. The G20210A prothrombin gene mutation appeared as heterozygosis in 5.90 percent of the individuals and as homozygosis in 0.18 percent. The present study shows the importance of genetic tests taking into account the profile of the studied population, and stressing the epidemiological information of the Brazilian population and the clinical benefits.

Prevalence of C282Y and H63D mutations in the HFE gene of Brazilian individuals with clinical suspicion of hereditary hemochromatosis / Prevalência das mutações C282Y e H63D no gene HFE em indivíduos brasileiros com suspeita clínica de hemocromatose hereditária

Classical hereditary hemochromatosis is a recessive autosomal disease related to a systemic iron overload that is frequently related to C282Y and H63D mutations in the HFE gene. In Brazil, reports on HFE gene mutation frequencies are rare, mainly in regards to a representative sample population. This study intended to determine theprevalence of C282Y and H63D mutations among individuals with clinical suspicion of hereditary hemochromatosis. A total of 1955 patients were studied with C282Y andH63D mutations being detected by the polymerase chain reaction technique followed by enzymatic restriction. The sample consisted of 76.6% men and 23.4% women. The highest percentage of analyzed individuals (56.9%) was concentrated in the 41 to 60- year-old age group. Although there were no genic or genotypic differences between genders, a higher number of over 60-year-old women was observed. The C282Y mutation was found as homozygous in 2.9% of the cases and as heterozygous in 10.1%, while the H63D was homozygous in 4.3% and heterozygous in 30.6%. The C282Y and H63D mutant allele frequencies were 0.079 and 0.196, respectively. Thehighest frequency was observed for H63D which was in genetic equilibrium. This work is important to determine the genetic profile of the population with hereditary hemochromatosis in Brazi.

A hemocromatose hereditária clássica (HH) é uma doença autossômica recessiva caracterizada por uma sobrecarga sistêmica de ferro, a qual está freqüentemente relacionada às mutações C282Y e H63D no gene HFE. No Brasil, registros das freqüências das mutações no gene HFE são raros, principalmente envolvendo uma amostra representativa da população. Este estudo teve como objetivo a determinação da prevalência das mutações C282Y e H63D em indivíduos com suspeita clínica de HH. Para isto, foram estudados 1955 pacientes para os quais as mutações C282Y e H63Dforam pesquisadas pela técnica de Reação em Cadeia da Polimerase seguida de digestão enzimática. A amostra consistiu de 76,6% homens e 23,4% de mulheres. A maioria dos indivíduos analisados (56,9%) estava concentrada no grupo de 41 a 60 anos. Embora não tenham sido observadas diferenças gênicas e genotípicas entreos gêneros, foi observado um maior número de mulheres na faixa etária acima dos 60 anos A mutação C282Y estava presente em homozigose em 2,9% dos indivíduos e em heterozigose em 10,1%, enquanto H63D estava presente em homozigose em 4,3% e emheterozigose em 30,6% dos indivíduos estudados. As freqüências dos alelos mutantes C282Y e H63D foram de 0,079 e 0,196, respectivamente. Além de mais freqüente entre a população estudada, a mutação H63D mostrou equilíbrio genético, ao contrário da mutação C282Y. Este trabalho tem como importância a determinação do perfil genético da população acometida pela HH no Brasil.